Nova formulação oftálmica contendo antissépticos e dexpantenol: atividade antimicrobiana in vitro e efeitos em células epiteliais da córnea e da conjuntiva

Resumo

A resistência aos antibióticos está a aumentar mesmo entre os agentes patogénicos oculares, o que tem levado a um crescente interesse pelo uso de antissépticos em Oftalmologia. O objetivo deste estudo foi analisar a eficácia antimicrobiana in vitro e os efeitos in vitro de uma formulação oftálmica contendo hexamidina diisetionato a 0,05%, biguanida poliexametileno (PHMB) a 0,0001%, edetato dissódico (EDTA) a 0,01%, dexpantenol a 5% e álcool polivinílico a 1,25% (Keratosept, Bruschettini, Génova, Itália) em células humanas epiteliais da córnea e da conjuntiva cultivadas.

A atividade antimicrobiana in vitro foi testada contra Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA), Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes e Streptococcus mitis. Para cada estirpe microbiana, 10 μL de um inóculo bacteriano padronizado de 0,5 MacFarland foram incubados a 25 °C com 100 μL da solução oftálmica durante até 6 horas. Após diferentes períodos de tempo, as amostras foram inoculadas em ágar sangue com 5% de sangue de carneiro. Além disso, um inóculo bacteriano de 0,5 MacFarland foi cultivado em triplicado em Ágar Mueller-Hinton ou em Ágar Mueller-Hinton Fastidious; de seguida, um disco de celulose embebido com 50 μL da solução oftálmica foi aplicado na superfície do ágar, e as placas foram incubadas durante 18 horas a 37 °C, de modo a avaliar a inibição do crescimento bacteriano em torno do disco.

As células epiteliais da córnea e da conjuntiva humanas in vitro foram incubadas durante 5, 10 e 15 minutos com Keratosept ou com os seus componentes. A citotoxicidade foi avaliada através da libertação da enzima citoplasmática lactato desidrogenase (LDH) no meio imediatamente após a exposição às substâncias; o ensaio de MTT (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio brometo) foi realizado para avaliar a atividade metabólica das células.

Os resultados mostraram que a solução oftálmica Keratosept proporcionou uma redução média logarítmica (log) da carga bacteriana de 2,14 ± 0,35 após 6 horas de exposição (p < 0,05 versus solução salina de controlo). Em placas de ágar, todas as estirpes microbianas, exceto P. aeruginosa, apresentaram uma zona de inibição de crescimento em torno dos discos embebidos com Keratosept. O Keratosept e os seus componentes não apresentaram qualquer efeito citotóxico nas células epiteliais da córnea e da conjuntiva cultivadas após 5 e 10 minutos de exposição; apenas após 15 minutos é que se observou uma redução significativa da viabilidade celular e um aumento da citotoxicidade em comparação com o controlo (veículo). O dexpantenol a 5% e o álcool polivinílico aceleraram o processo de cicatrização das células da córnea in vitro.

Em conclusão, o Keratosept demonstrou boa atividade antimicrobiana contra as estirpes testadas; a solução oftálmica e os seus componentes mostraram ser seguros e não tóxicos para as células epiteliais da córnea e da conjuntiva durante 5 e 10 minutos, nas concentrações analisadas, e o dexpantenol a 5% e o álcool polivinílico promoveram a cicatrização das células da córnea.

Mencucci, R., Favuzza, E., Bottino, P., Mazzantini, C., Zanotto, E., Pellegrini-Giampietro, D. E., & Landucci, E. (2020). A new ophthalmic formulation containing antiseptics and dexpanthenol: In vitro antimicrobial activity and effects on corneal and conjunctival epithelial cells. Experimental Eye Research, 201, 108269. https://doi.org/10.1016/j.exer.2020.108269 PMID: 32980315

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32980315/ 

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